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研究项目:爱情作用机制之分子生物学研究
申请人:心之草
研究方案:
一.爱情合成酶基因的克隆:
1.分别选取单恋、双恋、多角恋、婚外恋和无恋、失恋的人类个体为样品,利用differential display方法筛选上述不同个体间差异表达的cDNA片段,利用RACE方法获取基因全长;
2.利用Northern blot方法检测上述差异基因在不同个体处于不同情感状态下的表达水平,其中只在单恋、双恋、多角恋、婚外恋样品中高度表达,而在无恋、失恋个体中不表达的基因,则可能为爱情合成酶基因或刺激爱情合成的信号传导途径中的重要组分;
3.利用RNA干扰技术阻断上述基因在RNAi转基因个体中的表达,获得爱情缺陷型个体。给予这些个体以充分的爱情诱导刺激,其中一些爱情缺陷型在各种刺激条件下均面无表情但会在某些情况下(诸如社会压力、生活需要等)出现结婚现象,说明该个体所缺陷基因为爱情信号传导途径中的重要组分;如果转基因个体在各种刺激条件下均表现正常情感驿动却在完整生命周期内不出现结婚现象,则说明该缺陷基因为爱情合成酶基因。
二.爱情合成酶基因表达特性的研究:
1.利用(一)中所得cDNA序列信息克隆爱情合成酶基因的启动子,构建与GFP基因的嵌合基因,转化正常生长的雄性和雌性人类个体(注:GFP基因编码昆虫和一些海底生物的绿色荧光蛋白,例如夏夜里萤火虫的美丽就归功于此类基因的表达);
2.以发光程度为指标观测转基因个体在不同生长发育阶段、不同情感状态和不同环境刺激条件下,爱情合成酶基因启动子所驱动的外源GFP基因的表达状况,确定爱情合成酶基因表达的最适条件和表达特性,找到超人工调控爱情合成的最佳时机。
三.爱情合成酶基因的功能分析:
1.以组成型表达启动子与爱情合成酶基因构建嵌合基因,转化人类个体,获得组成型表达——即在任何年龄任何发育阶段任何环境状况下持续高量合成爱情的转基因人类个体;
2.以诱导型表达启动子,例如阳光诱导、鲜花诱导、雨雪诱导、春风诱导、冰雹诱导、疾病诱导、痛苦诱导、恐惧诱导、绝望诱导。。。等,与爱情合成酶基因构建嵌合基因,转化人类个体,获得诱导表达型——即在阳光、鲜花、雨雪、春风、冰雹、疾病、痛苦、恐惧、绝望等等条件下会在体内迅速合成爱情的转基因人类个体;
3.利用RNA干扰技术获得完全不表达爱情合成酶即爱情缺陷型转基因人类个体;
4.检测上述转基因人的表型,尤其是其在表达和不表达爱情的状况下与野生型正常人类的行为差异,据此可以推断爱情对人类个体行为的调控作用。
四.研究成果的应用:
通过对爱情合成酶基因的克隆、表达特性和功能分析,从理论上全面探索爱情对人类个体行为的调控作用和调控机理,学术意义重大;同时这一成果的取得,还为超人类利用生物工程技术、通过调控爱情的表达过程和表达水平、作用机制等,获得高效丰产耐劳耐用的转基因人类提供理论指导,具有深远的应用前景。
转自 心草的小屋[cabin.xilubbs.com] |
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